哮喘是一种常见的气道慢性炎症性疾病,目前我国有约 2000 万人罹患哮喘。近些年,由于雾霾等空气质量与环境污染程度的日益恶劣,呼吸系统疾病也逐渐成为了全世界范围影响人类健康最严重的慢性疾病之一,据世界卫生组织预测,到2025年,世界上将会有 4 亿人患上哮喘。 哮喘发 病 症 状 众 多,早 期 表 现 为 过 敏 性 炎症,后期由于气管平滑肌增生,阻塞气管,导致气道狭窄、气道高反应及气道重塑,患者出现胸闷、气喘等症状,严重时危及生命。因此,对哮喘的发病机理与治疗的研究是至关重要的。 在对哮喘发病机制的研究中,气管平滑肌是针对气道阻塞性症状的主要研究目标之一,针对气 管 平 滑 肌 细 胞 ( airway smooth muscle cells,ASMCs) 的形态学观察与细胞增殖速率的测量是在细胞生物学水平研究哮喘发病机制的常用手段。
名称 体积 浓度 保存条件 原代平滑肌细胞基础培养基 500ml 1× 4℃、避光 原代平滑肌细胞培养添加剂 5ml 100× -20℃、避光 胎牛血清(FBS) 25ml 终浓度5% -20℃、避光 双抗(青霉素/链霉素,P/S) 5ml 100× -20℃、避光
T25培养瓶 收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好,如有破损漏液等问题,请即时联系。正常请进行以下操作: 1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。 2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。 3. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张) 前三天照片为重要售后依据,不提供或未拍照默认收到状态良好。 4. 贴壁细胞:若细胞密度低于80%,无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养,待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上,可以将细胞传代处理。 悬浮细胞:将瓶内所有培养基离心收集,重悬计数根据密度进行分瓶,密度在3-5x10^5/ml为宜。 2ml冻存管 收到细胞后,检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周),建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系,会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明:两管一次性复苏出现问题不做售后。 15ml离心管 75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜,将15ml细胞悬液均匀接种到2个T25规格培养瓶,第二天观察细胞状态,根据密度进行换液或分瓶。