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【M-C1075】HT-29; HT 29; HT29

Organism: /human

Morphology: 上皮样/epithelial-like

Culture Properties: 贴壁/adherent

特征特性

该细胞是1964年由FoghJ用移植培养方法和含15%FBS+1% P/S的F12培养液从原发性肿瘤分离的。近来,已建株的培养细胞用含血清的McCoy's5a培养基培养。该细胞系在裸鼠中成瘤,也能在类固醇处理的地鼠中成瘤。该细胞可合成IgA、CEA、TGFβ结合蛋白和黏液素;表达尿激酶受体,但没有检测到血浆酶原活性;不表达CD4,但细胞表面表达半乳糖神经酰胺(HIV的可能替代受体)。该细胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos阳性;p53基因过表达,并且在273位密码子处发

培养条件

培养条件:McCoy’s 5A+10%FBS+1%P/S

培养环境:空气,95%;二氧化碳,5%

温度:37℃,培养箱湿度70%-80%

冻存条件:90%FBS,10%DMSO现配


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 冻存管

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操作手册

T25培养

收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好,如有破损漏液等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。

3. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张)

前三天照片为重要售后依据,不提供或未拍照默认收到状态良好。

4. 贴壁细胞:若细胞密度低于80%,无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养,待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上,可以将细胞传代处理。

悬浮细胞:将瓶内所有培养基离心收集,重悬计数根据密度进行分瓶,密度在3-5x10^5/ml为宜。

2ml冻存管

收到细胞后,检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周),建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系,会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明:两管一次性复苏出现问题不做售后。

15ml离心管

75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜,将15ml细胞悬液均匀接种到2T25规格培养瓶,第二天观察细胞状态,根据密度进行换液或分瓶