食管癌是世界最常见的六大恶性肿瘤之一，而我国是高发区之一。食管癌是发生在食管上皮组织的恶性肿瘤。细胞主要呈多角形，大小不等，胞浆丰富，胞核呈圆形或卵圆形，大小不等。此外，有研究表明，大部分来自于上皮的肿瘤细胞中均存在角蛋白。

当实体瘤超过1-2mm时，需要通过新生的血管和活化的癌相关成纤维细胞来获取癌细胞生长和增殖所必须的营养物质。其中，癌相关成纤维细胞可通过分泌多种细胞因子和生长因子来发挥促进癌血管生成的作用。

上皮间质转化（EMT）是一种胚胎发育期的表型转化，在肿瘤转移过程中也能观察到相似的EMT过程。而由上皮和间质相互作用所形成的肿瘤-宿主界面微环境的平衡状态直接决定肿瘤的发生发展。多种因素可影响该界面，其中癌相关成纤维细胞是数量最丰富的基质细胞，在调节肿瘤细胞EMT过程中发挥重要作用。它通过细胞与细胞间相互接触及分泌各种细胞因子、蛋白酶类等，促进上皮细胞及其细胞恶性转化，并对界面各组分产生重要的调控作用。

T25培养瓶

收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好，如有破损漏液等问题，请即时联系。正常请进行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。

3. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）

前三天照片为重要售后依据，不提供或未拍照默认收到状态良好。

4. 贴壁细胞：若细胞密度低于80%，无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养，待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上，可以将细胞传代处理。

悬浮细胞：将瓶内所有培养基离心收集，重悬计数根据密度进行分瓶，密度在3-5x10^5/ml为宜。

2ml冻存管

收到细胞后，检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题，请即时联系。正常请进行以下操作：将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周）,建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系，会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明：两管一次性复苏出现问题不做售后。

15ml离心管

75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜，将15ml细胞悬液均匀接种到2个T25规格培养瓶，第二天观察细胞状态，根据密度进行换液或分瓶。