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【M-C1289】人胰腺癌相关成纤维细胞永生化(免疫荧光鉴定)

1) 细胞来源于人手术胰腺癌组织。
2) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
3) 细胞生长方式:长梭形,贴壁培养。

特征特性

癌组织由实质和间质两部分构成,癌细胞构成癌实质,是癌的主要成分,具有组织来源特异性,癌间质一般由结缔组织和血管组成,起支持和营养癌实质的作用,不具有特异性。

当实体瘤超过1-2mm时,需要通过新生的血管和活化的癌相关成纤维细胞来获取癌细胞生长和增殖所必须的营养物质。其中,癌相关成纤维细胞可通过分泌多种细胞因子和生长因子来发挥促进癌血管生成的作用。

上皮间质转化(EMT)是一种胚胎发育期的表型转化,在肿瘤转移过程中也能观察到相似的EMT过程。而由上皮和间质相互作用所形成的肿瘤-宿主界面微环境的平衡状态直接决定肿瘤的发生发展。多种因素可影响该界面,其中癌相关成纤维细胞是数量最丰富的基质细胞,在调节肿瘤细胞EMT过程中发挥重要作用。它通过细胞与细胞间相互接触及分泌各种细胞因子、蛋白酶类等,促进上皮细胞及其细胞恶性转化,并对界面各组分产生重要的调控作用。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。


培养条件

名称

体积

浓度

保存条件

原代成纤维细胞基础培养基

500ml

4、避光

原代成纤维细胞培养添加剂

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS

25ml

终浓度5%

-20℃、避光

双抗(青霉素/链霉素,P/S

5ml

100×

-20℃、避光

订购详情

发货形式 规格 数量 价格 货期
冻存管/T25 >1x10^6/1ml X1/T25 询价 现货

操作手册

T25培养瓶
收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好,如有破损漏液等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。
2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。
3. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张)
前三天照片为重要售后依据,不提供或未拍照默认收到状态良好。
4. 贴壁细胞:若细胞密度低于80%,无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养,待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上,可以将细胞传代处理。
悬浮细胞:将瓶内所有培养基离心收集,重悬计数根据密度进行分瓶,密度在3-5x10^5/ml为宜。

2ml冻存管
收到细胞后,检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周),建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系,会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明:两管一次性复苏出现问题不做售后。

15ml离心管
75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜,将15ml细胞悬液均匀接种到2个T25规格培养瓶,第二天观察细胞状态,根据密度进行换液或分瓶。