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【M-C1368】RAW264.7+GFP 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞绿色荧光标记(种属鉴定)

1) 来源:鼠科白血病病毒诱导的肿瘤;单核细胞;巨噬细胞
2) 形态:不规则圆形,纺锤状,贴壁细胞,少量悬浮。
3) 含量:>1x106  细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。

特征特性

此细胞株源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。此细胞株不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖。可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导分解红血球但对肿瘤靶细胞无作用。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带GFP基因。



培养条件

DMEM-H+10%FBS +1%+1%P/S

培养环境:空气,95%; =氧化碳, 5%

温度: 37°C,培养箱湿度70%-80%

冻存条件:90%FBS,10%DMSO现配

2) 注意事项:

(a)在细胞生长的初始阶段,细胞以贴壁的形式生长并呈现出长方体的形态和有“伪足”延伸。随着培养时间的增加,细胞呈现圆形并以叠加的形式生长。细胞密度达到一定的程度,会有细胞以悬浮的方式散落到到培养基中,镜下观察会发现悬浮和贴壁的细胞会同时出现。

(b)该细胞传代时不需要用胰酶消化。传代时,用无菌细胞刮刮拭培养表面将细胞刮落,收集离心后重悬接种到新的培养瓶中。(c)该细胞形态上包含松散贴壁的纺锤形和圆形或者立方形。当细胞密度较大时,细胞会轻微脱落变圆或者许多细胞堆积在一起,有些细胞甚至脱落漂浮。这些漂浮的细胞是存活的,在传代时应收集起来,离心后细胞沉淀可以继续培养。

(d)血清质量差异可能引起细胞贴壁能力变化,应选用高质量的胎牛血清。

订购详情

发货形式 规格 数量 价格 货期
冻存管/T25 >1x10^6/1ml X1/T25 询价 现货

操作手册

T25培养瓶
收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好,如有破损漏液等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。
2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。
3. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张)
前三天照片为重要售后依据,不提供或未拍照默认收到状态良好。
4. 贴壁细胞:若细胞密度低于80%,无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养,待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上,可以将细胞传代处理。
悬浮细胞:将瓶内所有培养基离心收集,重悬计数根据密度进行分瓶,密度在3-5x10^5/ml为宜。

2ml冻存管
收到细胞后,检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周),建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系,会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明:两管一次性复苏出现问题不做售后。

15ml离心管
75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜,将15ml细胞悬液均匀接种到2个T25规格培养瓶,第二天观察细胞状态,根据密度进行换液或分瓶。