特征特性

角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不同，中央部最薄。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。

角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是极为重要的手段，常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。

培养条件

名称	体积	浓度	保存条件
原代上皮细胞基础培养基	500ml	1×	4℃、避光
原代上皮细胞培养添加剂	5ml	100×	-20℃、避光
胎牛血清（FBS）	25ml	终浓度5%	-20℃、避光
双抗（青霉素/链霉素，P/S）	5ml	100×	-20℃、避光

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发货形式	规格	数量	价格	货期
冻存管/T25	>1x10^6/1ml	X1/T25	询价	现货

操作手册

T25培养瓶
收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好，如有破损漏液等问题，请即时联系。正常请进行以下操作：
1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。
2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。
3. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）
前三天照片为重要售后依据，不提供或未拍照默认收到状态良好。
4. 贴壁细胞：若细胞密度低于80%，无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养，待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上，可以将细胞传代处理。
悬浮细胞：将瓶内所有培养基离心收集，重悬计数根据密度进行分瓶，密度在3-5x10^5/ml为宜。

2ml冻存管
收到细胞后，检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题，请即时联系。正常请进行以下操作：将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周）,建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系，会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明：两管一次性复苏出现问题不做售后。

15ml离心管
75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜，将15ml细胞悬液均匀接种到2个T25规格培养瓶，第二天观察细胞状态，根据密度进行换液或分瓶。

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【M-C1379】小鼠角膜上皮细胞永生化（免疫荧光鉴定）

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