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【M-C1124】NCI-H209; H209; H-209; NCIH209

Organism: /human

Morphology: 淋巴母细胞样/lymphoblast

Culture Properties: 悬浮/suspension


特征特性

该细胞由Gazdar AF及其同事于1979年从一名小细胞肺癌患者的骨髓转移灶中分离建立,该骨髓标本的获取先于患者的治疗。该细胞是一种典型的小细胞性肺癌细胞,表达较高水平的4种生化标志:神经特异性烯醇、肌酸激酶脑型同工酶、左旋多巴脱羧酶、铃蟾肽样免疫活性。c-myc DNA序列没有扩增;未发现大的结构DNA的异常;该细胞合成与正常肺相当量的p53 mRNA。该细胞以聚集体的形式悬浮生长,只有聚集体中的细胞是有活力的,但是细胞活率无法估计,一般培养基中含有大量的细胞碎片。

培养条件

培养条件:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S

培养环境:空气,95%;二氧化碳,5%

温度:37℃,培养箱湿度70%-80%

冻存条件:90%FBS,10%DMSO现配


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 冻存管

 >1x10^6/1ml

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操作手册

T25培养

收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好,如有破损漏液等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。

3. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张)

前三天照片为重要售后依据,不提供或未拍照默认收到状态良好。

4. 贴壁细胞:若细胞密度低于80%,无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养,待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上,可以将细胞传代处理。

悬浮细胞:将瓶内所有培养基离心收集,重悬计数根据密度进行分瓶,密度在3-5x10^5/ml为宜。

2ml冻存管

收到细胞后,检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周),建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系,会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明:两管一次性复苏出现问题不做售后。

15ml离心管

75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜,将15ml细胞悬液均匀接种到2T25规格培养瓶,第二天观察细胞状态,根据密度进行换液或分瓶