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【M-C1128】NCI-H23; NCI.H23; NCI H23; H23; H-23; NCIH23

Organism: /human

Morphology: 上皮样/epithelial-like

Culture Properties: 贴壁/adherent

特征特性

该细胞源于一位51岁患有非小细胞肺癌黑人男性患者的治疗前的肿瘤组织,表达C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs;该细胞携带K-ras 12突变;p53基因246位密码子突变ATC→ATG;表达PDGF A和B链的异源mRNA;表达TGFα、TGFβ和EGFR;角蛋白 5、8和18阳性,波形蛋白阳性,神经丝蛋白阴性,左旋多巴脱氢酶阴性;据报道,在软琼脂中该细胞形成克隆的效率为9.7%。

培养条件

培养条件:RPMI-1640+10%FBS+1% P/S+1%Glutamax+1%Sodium Pyruvate

培养环境:空气,95%;二氧化碳,5%

温度:37℃,培养箱湿度70%-80%

冻存条件:90%FBS,10%DMSO现配


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 冻存管

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操作手册

T25培养

收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好,如有破损漏液等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。

3. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张)

前三天照片为重要售后依据,不提供或未拍照默认收到状态良好。

4. 贴壁细胞:若细胞密度低于80%,无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养,待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上,可以将细胞传代处理。

悬浮细胞:将瓶内所有培养基离心收集,重悬计数根据密度进行分瓶,密度在3-5x10^5/ml为宜。

2ml冻存管

收到细胞后,检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周),建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系,会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明:两管一次性复苏出现问题不做售后。

15ml离心管

75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜,将15ml细胞悬液均匀接种到2T25规格培养瓶,第二天观察细胞状态,根据密度进行换液或分瓶