肝星状细胞位于Disse间隙内,紧贴着肝窦内皮细胞和肝实质细胞。其形态不规则,胞体呈圆形或不规则形,常伸出数个星状胞突包绕着肝血窦。 正常情况下肝星状细胞表现为富含维生素A脂滴的静止型,其功能主要有:代谢和贮存维生素A、储存脂肪、合成和分泌胶原及糖蛋白、蛋白多糖等基质成分、合成基质金属蛋白酶及其组织抑制剂、表达细胞因子及受体、参与肝窦血流调节。 肝星状细胞是细胞外基质的主要来源,正常情况下肝星状细胞处于静止状态。当肝脏受到炎症或机械刺激等损伤时,肝星状细胞被激活,其表型由静止型转变为激活型,肝星状细胞激活并转化为肌成纤维细胞样细胞,各种致纤维化因素均把HSC作为最终靶细胞。激活的肝星状细胞一方面通过增生和分泌细胞外基质参与肝纤维化的形成和肝内结构的重建,另一方面通过细胞收缩使肝窦内压升高。
名称 体积 浓度 保存条件 原代星状细胞基础培养基 500ml 1× 4℃、避光 原代星状细胞培养添加剂 5ml 100× -20℃、避光 胎牛血清(FBS) 25ml 终浓度5% -20℃、避光 双抗(青霉素/链霉素,P/S) 5ml 100× -20℃、避光
T25培养瓶 收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好,如有破损漏液等问题,请即时联系。正常请进行以下操作: 1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。 2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。 3. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张) 前三天照片为重要售后依据,不提供或未拍照默认收到状态良好。 4. 贴壁细胞:若细胞密度低于80%,无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养,待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上,可以将细胞传代处理。 悬浮细胞:将瓶内所有培养基离心收集,重悬计数根据密度进行分瓶,密度在3-5x10^5/ml为宜。 2ml冻存管 收到细胞后,检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周),建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系,会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明:两管一次性复苏出现问题不做售后。 15ml离心管 75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜,将15ml细胞悬液均匀接种到2个T25规格培养瓶,第二天观察细胞状态,根据密度进行换液或分瓶。