直肠是自肛缘起向上15cm的一段大肠。直肠周围多脂肪、无纵带，位于膀胱和生殖器官的背侧。 直肠横切面由内到外依次为：粘膜（上皮层，固有层，粘膜肌层），粘膜下层，肌层，外膜。 成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，肿瘤间质对肿瘤的发生发展有着重要作用。成纤维细胞是肿瘤间质的重要组成成分,与肿瘤复发、转移等密切相关。肿瘤间质中成纤维细胞活化为癌相关成纤维细胞是肿瘤细胞-成纤维细胞相互作用过程中的一个重要过程,是成纤维细胞发挥肿瘤调节作用的关键。同时成纤维细胞的变化也与许多其他直肠疾病密切相关。
名称 体积 浓度 保存条件 原代成纤维细胞基础培养基 500ml 1× 4℃、避光 原代成纤维细胞培养添加剂 5ml 100× -20℃、避光 胎牛血清（FBS） 25ml 终浓度5% -20℃、避光 双抗（青霉素/链霉素，P/S） 5ml 100× -20℃、避光
T25培养瓶 收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好，如有破损漏液等问题，请即时联系。正常请进行以下操作： 1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。 2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。 3. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张） 前三天照片为重要售后依据，不提供或未拍照默认收到状态良好。 4. 贴壁细胞：若细胞密度低于80%，无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养，待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上，可以将细胞传代处理。 悬浮细胞：将瓶内所有培养基离心收集，重悬计数根据密度进行分瓶，密度在3-5x10^5/ml为宜。 2ml冻存管 收到细胞后，检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题，请即时联系。正常请进行以下操作：将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周）,建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系，会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明：两管一次性复苏出现问题不做售后。 15ml离心管 75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜，将15ml细胞悬液均匀接种到2个T25规格培养瓶，第二天观察细胞状态，根据密度进行换液或分瓶。
