前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化了的前体细胞,它的存在和作用持续于人的一生,与肥胖及Ⅱ型糖尿病都有密切的关系。近年来,人们对脂肪细胞有了更深入的认识,它不仅是单纯的能量贮存器官,还通过内分泌、旁分泌、自分泌和胞内分泌等途径,与其他神经内分泌和免疫器官形成广泛联络的神经一内分泌一免疫网络,通过各种脂肪细胞因子发挥众多的生理和病理作用。同时,脂肪组织还是多能干细胞的重要来源。因此,建立人前脂肪细胞培养体系,研究其脂肪沉积与组织发育机理,具有重要的理论与实践意义。
名称 体积 浓度 保存条件 原代前脂肪细胞基础培养基 500ml 1× 4℃、避光 原代前脂肪细胞培养添加剂 5ml 100× -20℃、避光 胎牛血清(FBS) 25ml 终浓度5% -20℃、避光 双抗(青霉素/链霉素,P/S) 5ml 100× -20℃、避光
T25培养瓶 收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好,如有破损漏液等问题,请即时联系。正常请进行以下操作: 1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。 2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。 3. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张) 前三天照片为重要售后依据,不提供或未拍照默认收到状态良好。 4. 贴壁细胞:若细胞密度低于80%,无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养,待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上,可以将细胞传代处理。 悬浮细胞:将瓶内所有培养基离心收集,重悬计数根据密度进行分瓶,密度在3-5x10^5/ml为宜。 2ml冻存管 收到细胞后,检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周),建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系,会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明:两管一次性复苏出现问题不做售后。 15ml离心管 75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜,将15ml细胞悬液均匀接种到2个T25规格培养瓶,第二天观察细胞状态,根据密度进行换液或分瓶。