特征特性

NCI-H295R细胞是源于多能肾上腺皮质癌细胞系NCI-H295细胞，后者由Gazdar·A·F等建立，从肾上腺皮质的肿瘤中分离而来。NCI-H295细胞经改变培养条件获得了NCI-295R细胞，群体倍增时间从原来的5天减为2天。NCI-295细胞悬浮生长，而NCI-H295R细胞呈单层贴壁生长。NCI-H295R细胞保留了产生雄激素的能力，对血管紧张素Ⅱ和钾离子有反应。

培养条件

培养条件:DMEM/F12培养基；FBS，10%； Insulin ，6.25μg/mL；Transferrin，6.25μg/mL＋+Selenium，6.25ng/mL；5.35μg/mL，LinoleicAcid（sigma，L5900）；p/s双抗，1%。

培养环境:空气，95%；二氧化碳，5%

温度：37℃，培养箱湿度70%-80%

冻存条件:90%FBS，10%DMSO现配

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发货形式	规格	数量	价格	货期
冻存管/T25	>1x10^6/1ml	X1/T25	询价	现货

操作手册

T25培养瓶
收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好，如有破损漏液等问题，请即时联系。正常请进行以下操作：
1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。
2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。
3. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）
前三天照片为重要售后依据，不提供或未拍照默认收到状态良好。
4. 贴壁细胞：若细胞密度低于80%，无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养，待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上，可以将细胞传代处理。
悬浮细胞：将瓶内所有培养基离心收集，重悬计数根据密度进行分瓶，密度在3-5x10^5/ml为宜。

2ml冻存管
收到细胞后，检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题，请即时联系。正常请进行以下操作：将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周）,建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系，会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明：两管一次性复苏出现问题不做售后。

15ml离心管
75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜，将15ml细胞悬液均匀接种到2个T25规格培养瓶，第二天观察细胞状态，根据密度进行换液或分瓶。

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【M-C7105】NCI-H295R; NCI H295R; NCIH295R; H295R; H-295R; H295R-S1

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