培养条件:DMEM（高糖） +10% FBS+2.5%马血清+1% P/S

培养环境:空气，95%；二氧化碳，5%

温度：37℃，培养箱湿度70%-80%

冻存条件:90%FBS，10%DMSO现配

T25培养瓶

收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好，如有破损漏液等问题，请即时联系。正常请进行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。

3. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）

前三天照片为重要售后依据，不提供或未拍照默认收到状态良好。

4. 贴壁细胞：若细胞密度低于80%，无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养，待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上，可以将细胞传代处理。

悬浮细胞：将瓶内所有培养基离心收集，重悬计数根据密度进行分瓶，密度在3-5x10^5/ml为宜。

2ml冻存管

收到细胞后，检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题，请即时联系。正常请进行以下操作：将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周）,建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系，会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明：两管一次性复苏出现问题不做售后。

15ml离心管

75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜，将15ml细胞悬液均匀接种到2个T25规格培养瓶，第二天观察细胞状态，根据密度进行换液或分瓶。