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【M-C3027】9L/lacZ

Organism: 大鼠/Mouse

Morphology: 上皮样/epithelial-like

Culture Properties: 贴壁/adherent

特征特性

9L/lacZ细胞株1989年从9L细胞株(大鼠硝基脲诱导的胶质瘤细胞株)发展而来。 用携带E. coli编码beta-半乳糖苷酶lacZ基因和带来G418抗性的Tn5新霉素基因BAG复制缺陷的逆转录病毒载体感染9L细胞株。 细胞在G418存在下培养14天,克隆,并检测beta-半乳糖苷酶生成。 9L/lacZ产生高水平的酶,选择其进行后续研究。 细胞持续表达lacZ报告基因产物,从E. coli衍生来的beta-半乳糖苷酶,从而可以通过组织切片的组织化学染色来鉴定单个肿瘤细胞。 同一片子上的淋巴细胞和其它响应细胞也可以通过双标记抗体进行鉴定。 染色细胞和背景的对比有益于图像分析。 这是少数允许量化分析的大脑微观肿瘤模型中的一种。 这种肿瘤模仿了人类大脑肿瘤的生长和传播的重要特性。 beta-半乳糖苷酶的表达十分稳定,但细胞培养数月后应该重新进行克隆。

培养条件

培养条件:DMEM(高糖)+10% FBS+1% P/S

培养环境:空气,95%;二氧化碳,5%

温度:37℃,培养箱湿度70%-80%

冻存条件:90%FBS,10%DMSO现配

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冻存管

>1x10^6/1ml

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操作手册

T25培养

收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好,如有破损漏液等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。

3. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张)

前三天照片为重要售后依据,不提供或未拍照默认收到状态良好。

4. 贴壁细胞:若细胞密度低于80%,无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养,待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上,可以将细胞传代处理。

悬浮细胞:将瓶内所有培养基离心收集,重悬计数根据密度进行分瓶,密度在3-5x10^5/ml为宜。

2ml冻存管

收到细胞后,检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周),建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系,会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明:两管一次性复苏出现问题不做售后。

15ml离心管

75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜,将15ml细胞悬液均匀接种到2个T25规格培养瓶,第二天观察细胞状态,根据密度进行换液或分瓶。