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【M-C7202】 THLE-2; THLE2; Transformed Human Liver Epithelial-2

Organism: /human

Morphology: 上皮样/epithelial-like

Culture Properties: 贴壁/adherent

特征特性

THLE-2 是从供体左叶分离的上皮细胞,TTHLE-2 ( ATCC CRL-2706和 THLE-3 ( ATCC CRL-11233 ) 细胞系是通过感染 SV40 大 T 抗原从原代正常肝细胞中获得的。[RF84749] 该病毒是通过引入含有将SV40 T抗原的Bgl I-Hpa I片段导入两性包装细胞系PA317。[RF84750] THLE-2 和 THLE-3 细胞表达正常成人肝上皮细胞的表型特征。当注射到无胸腺裸鼠体内时,它们不会产生肿瘤,具有接近二倍体的核型,并且不表达甲胎蛋白。[RF84750] THLE-2 和 THLE-3 细胞将苯并[a]芘、N-亚硝基二甲胺和黄曲霉毒素 B1 代谢为其最终致癌代谢物,这些代谢物会加合 DNA,这表明功能性细胞色素 P450 途径。[RF84750] 其他参与化学致癌物代谢的酶,例如环氧化物水解酶、NADPH 细胞色素 P450 还原酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽 S-转移酶和谷胱甘肽过氧化物酶也被 THLE 细胞保留。

培养条件

培养条件:BEGM+10%FBS+5ng/mL EGF+70ng/mL磷乙醇胺

培养环境:空气,95%;二氧化碳,5%

温度:37℃,培养箱湿度70%-80%

冻存条件:90%FBS,10%DMSO现配

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冻存管

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操作手册

T25培养

收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好,如有破损漏液等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。

3. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张)

前三天照片为重要售后依据,不提供或未拍照默认收到状态良好。

4. 贴壁细胞:若细胞密度低于80%,无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml培养基放37度培养箱培养,待细胞密度达到80%以上进行传代。密度80%以上,可以将细胞传代处理。

悬浮细胞:将瓶内所有培养基离心收集,重悬计数根据密度进行分瓶,密度在3-5x10^5/ml为宜。

2ml冻存管

收到细胞后,检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题,请即时联系。正常请进行以下操作:将细胞取出转移至液氮保存或-80度冰箱(不超过一周),建议尽早复苏。复苏第一管后有活性状态问题及时与我们联系,会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明:两管一次性复苏出现问题不做售后。

15ml离心管

75%酒精棉球擦拭15ml离心管外部去封口膜,将15ml细胞悬液均匀接种到2个T25规格培养瓶,第二天观察细胞状态,根据密度进行换液或分瓶。