【M-CDRY0100-5001】iPS细胞消化液 500ML

操作说明
1. 将iPS完全培养基取出并平衡至室温，取出包被过Matrix的培养皿/瓶，吸去包被液并加入适量完全培养基，置于5% CO2的37℃恒温细胞培养箱中。
2. 吸走待传代细胞培养皿/瓶中的iPS完全培养基，并且加入无钙镁的PBS溶液洗一次。
3. 加入0.5mM EDTA传代工作液使之完全覆盖皿/瓶底。
4. 室温放置5 ~ 8 min或37℃恒温细胞培养箱中孵育3 ~ 5 min，显微镜下观察到大部分克隆边缘开始脱离皿/瓶底，克隆内部大部分细胞间出现间隙但尚未相互分离，肉眼观察到细胞集落变得不透明且发白，表明细胞消化时间理想。
5. 吸去传代工作液，即刻加入新鲜的iPS完全培养基，用移液器扇形吹打培养皿/瓶底，使皿/瓶底贴附的干细胞集落脱落，轻柔缓慢吹吸混匀。
注：吹吸的力度要轻柔，吹打脱落和吹吸混匀的次数总共不超过10次为宜。吹打过度导致大量单细胞出现是造成细胞分化或死亡的重要原因。
注：如有少量细胞无法从皿底脱落，属于正常现象。如有大量细胞无法从皿底脱落，需延长消化时间。
6. 显微镜下观察细胞呈4 ~ 20个细胞大小的团块，水平十字摇匀。
7. 将细胞置于5% CO2的37℃恒温培养箱培养。
8. 每天换液直至达到可以传代的标准。